नोवेल कोरोनावायरस न्यूक्लिक एसिड डिटेक्शन

न्यूक्लिक एसिड का पता लगाने में प्रारंभिक निदान, उच्च संवेदनशीलता और विशिष्टता की विशेषताएं हैं, और यह नए कोरोनरी निमोनिया के निदान के लिए "स्वर्ण मानक" है।वर्तमान में, सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल किया जाने वाला वास्तविक समय फ्लोरोसेंट मात्रात्मक आरटी-पीसीआर तकनीक है।आमतौर पर, वायरस के ORF1ab और N जीन पर स्थित दो लक्ष्यों का पता लगाया जाता है।एक ही नमूने को दोहरा लक्ष्य सकारात्मक या एकल लक्ष्य सकारात्मक के रूप में दोहराया गया परीक्षण पूरा करना चाहिए, या SARS-CoV-2 वायरस न्यूक्लिक एसिड के सकारात्मक की पुष्टि करने के लिए दो नमूनों को एक ही समय में एकल लक्ष्य को पूरा करना चाहिए।

1. न्यूक्लिक एसिड डिटेक्शन किट का सिद्धांत?विषाणु के अद्वितीय जीन अनुक्रम का पता लगाने के लक्ष्य के रूप में उपयोग किया जाता है।पीसीआर प्रवर्धन के माध्यम से, हम जो लक्ष्य डीएनए अनुक्रम चुनते हैं, वह तेजी से बढ़ता है।प्रत्येक प्रवर्धित डीएनए अनुक्रम को एक फ्लोरोसेंट-लेबल जांच के साथ जोड़ा जा सकता है जिसे हमने पहले से जोड़ा था।, फ्लोरोसेंट सिग्नल का उत्पादन करें, जितना अधिक लक्ष्य जीन प्रवर्धित होगा, संचित फ्लोरोसेंट सिग्नल उतना ही मजबूत होगा।वायरस के बिना नमूनों में, चूंकि कोई लक्ष्य जीन प्रवर्धन नहीं है, इसलिए प्रतिदीप्ति संकेत में कोई वृद्धि नहीं पाई जा सकती है।इसलिए, न्यूक्लिक एसिड का पता लगाना वास्तव में यह निर्धारित करना है कि फ्लोरोसेंट संकेतों के संचय का पता लगाकर नमूने में वायरल न्यूक्लिक एसिड है या नहीं।

2. न्यूक्लिक एसिड परीक्षण के नमूने किस प्रकार के होते हैं?

आम तौर पर, नाक की सूजन, गले की सूजन, नासॉफिरिन्जियल स्वैब, थूक, ब्रोन्कियल लैवेज द्रव, वायुकोशीय लैवेज द्रव और इतने पर।

3. पांच चरणों में पता लगाना नई कोरोनावायरस पहचान प्रक्रिया के लिए पांच चरणों की आवश्यकता होती है: नमूनाकरण, नमूना प्रतिधारण, भंडारण, न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण और कंप्यूटर परीक्षण।इसे पूरा करने के लिए कठोर वैज्ञानिक प्रयोगों की आवश्यकता है।

1. ग्रसनी स्वाब और द्विपक्षीय ग्रसनी टॉन्सिल की पिछली दीवार को ग्रसनी स्वाब से 5-10 बार पोंछें, और स्वाब को घुमाते रहें;

2. नमूना रखने के लिए चिकित्सा कर्मियों की आवश्यकता होती है, और स्वाब सिर को सेल संरक्षण समाधान में डुबोया जाता है, और पूंछ टूट जाती है।ट्यूब कैप को तुरंत कस लें;

3. सहेजें, नमूना ट्यूब को एक सीलबंद बैग में रखें और इसे समय पर निरीक्षण के लिए भेजें, और निरीक्षण प्रक्रिया के लिए 2-8 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत एक सख्त परिवहन वातावरण की आवश्यकता होती है।

4. न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण का संचालन करें, बाद में पता लगाने के लिए निष्क्रिय वायरस के नमूने से न्यूक्लिक एसिड निकालें, और स्वचालित उपकरण, जैसे न्यूक्लिक एसिड एक्सट्रैक्टर का उपयोग करें।

5. फ्लोरेसेंस पीसीआर न्यूक्लिक एसिड डिटेक्शन, यानी मशीन डिटेक्शन, एक्सट्रेक्ट को फ्लोरोसेंट पीसीआर एम्पलीफिकेशन रिएक्शन से गुजरने में 70-80 मिनट लगते हैं।

4. न्यूक्लिक एसिड का पता लगाने में क्या समस्याएं हैं?

गलत नमूना, अनुचित नमूना भंडारण, विभिन्न प्रकार के नमूनों का उपयोग, और विभिन्न निर्माताओं के अभिकर्मकों के उपयोग के कारण गलत नकारात्मक, न्यूक्लिक एसिड परीक्षण के परिणाम "गलत नकारात्मक" और चूक निदान के कारण हो सकते हैं;

पता लगाने वाले उपकरणों या प्लेटफार्मों के लिए उच्च आवश्यकताएं, उच्च संवेदनशीलता आरटी-पीसीआर उपकरण महंगे हैं, और उच्च प्रयोगशाला सफाई और ऑपरेटरों की आवश्यकता होती है;

न्यूक्लिक एसिड परीक्षण में लंबा समय लगता है, और आरटी-पीसीआर परीक्षण को पूरा करने में आमतौर पर 4-6 घंटे लगते हैं।हालांकि, नमूना परिवहन पर विचार करते हुए, नमूनों के एक बड़े बैकलॉग के मामले में, परिणाम आमतौर पर 24 घंटे में ही रिपोर्ट किए जा सकते हैं।इसलिए, जब न्यूक्लिक एसिड परीक्षण नकारात्मक होता है, तो आईजीएम और आईजीजी एंटीबॉडी का पता लगाने से उन कमियों की भरपाई हो सकती है जो न्यूक्लिक एसिड परीक्षण के कारण चूक निदान होने की संभावना है।